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如何做好酶标仪的自检和校准工作
更新时间:2016-03-10   点击次数:1645次
酶标仪的自检和校准从上述所获的酶标仪性能的有关信息资料,基本上可以说是间接的,有了目标以后,如果还想获得对某一酶标仪的感性认识,可以对其进行自检,主要有下述几个方面:
(一)外观
酶标仪上应有仪器名称,型号,编号,生产厂家,出厂日期和电源电压;各调节旋钮,按键和开关均能正常工作,外表面无明显机械损伤;显示文字应清楚完整。
(二)酶标仪的稳定性(漂移)
选用492nm波长,在吸光度o.0A处,测量标称值为1.0A的光谱中性滤光片(测量操作按仪器说明进行),记录仪器示值或均值,10min后再次记录仪器示值或均值,前后两次测量值之差不应超过±0.00。
(三)吸光度测量的准确度
选用405,492和620nm波长,以空气为参比,分别测量标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片,用测试板代替酶标板,按仪器说明连续测量3次,按下式计算准确度:AA=1/3(A、+A。+A3)—A:(A:为标准值)。
(四)吸光度测量的重复性
波长选用同(3),在酶标板*排加注空白溶液,第二排加入浓度为200rig/ml的重铬酸钾溶液,重复测量5次。记录每次测量的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。按下式计算重复性:
(五)酶标仪的线性
选用540nm波长,将标称值o.5,1.0A中性滤光片分别放入测试板样本位置中,以空气为参比,各重复测量3次;然后将以上两片中性滤光片叠加后置于测试板的同一孔位中,重复测量3次。线性误差:
式中A1为*片中性滤光片吸光度均值,A:为第二片中性滤光片吸光度均值,A1,2为两片中性滤光片叠加后的吸光度均值。
(六)测量速度的检定
选用492nm波长,放人96孔酶标板进行测量,用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。
酶标仪除了在选购时,应尽可能自检外,在用于中也应定期检定,以保证酶标仪测量的有效性。
将重铬酸钾固体试剂放人称量瓶中(去盖)置于烘箱中,在105±5℃下烘2h后,置于干燥器内冷却30min,在分析天平上准确称取o.2829g,置于100ml烧杯中,用o.05mol/L稀硫酸溶解后,移入500ml容量瓶中,以少量o.05mol/L稀硫酸洗烧杯3次,洗液并入容量瓶中,用0.05mol/L稀硫酸稀释刻度线,摇匀。

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